Identification of a prototypical single-stranded uracil DNA glycosylase from Listeria innocua

A recent phylogenetic study on UDG superfamily estimated a new clade of family 3 enzymes (SMUG1-like), which shares a lower homology with canonic SMUG1 enzymes. The enzymatic properties of the newly found putative DNA glycosylase are unknown. To test the potential UDG activity and evaluate phylogenetic classification, we isolated one SMUG1-like glycosylase representative from Listeria innocua (Lin). A biochemical screening of DNA glycosylase activity in vitro indicates that Lin SMUG1-like glycosylase is a single-strand selective uracil DNA glycosylase. The UDG activity on DNA bubble structures provides clue to its physiological significance in vivo. Mutagenesis and molecular modeling analyses reveal that Lin SMUG1-like glycosylase has similar functional motifs with SMUG1 enzymes; however, it contains a distinct catalytic doublet S67-S68 in motif 1 that is not found in any families in the UDG superfamily. Experimental investigation shows that the S67M-S68N double mutant is catalytically more active than either S67M or S68N single mutant. Coupled with mutual information analysis, the results indicate a high degree of correlation in the evolution of SMUG1-like enzymes. This study underscores the functional and catalytic diversity in the evolution of enzymes in UDG superfamily.     

Apparent gene conversion in an Escherichia coli rec+ strain is explained by multiple rounds of reciprocal crossing-over

Summary Gene conversion, the non-reciprocal transfer of sequence information between homologous DNA sequences, has been reported in lower eukaryotes, mammals and in Escherichia coli. In an E. coli rec ⁺ strain, we established a plasmid carrying two different deleted neo genes (neoDL and neoDR) in an inverted orientation and then selected for homologous recombination events that had reconstructed an intact neo ⁺ gene. We found some plasmids that had apparently experienced intramolecular gene conversion. Further evidence, however, suggests that they are products of multiple rounds of reciprocal crossing-over,apparently involving two plasmid molecules. First, most of the Neo⁺ clones contained multiple types of Neo⁺ plasmids, although the frequency of producing the neo ⁺ clones was low. Second, all the neo ⁺ clones also contained, as a minority, one particular form of dimer, which can be formed by reciprocal crossing-over between neoDL of one plasmid molecule and neoDR of another plasmid molecule. Third, in reconstruction experiments, we cloned and purified this dimer and transferred it back into the rec ⁺ cells. The dimer gave rise to clones containing multiple types of neo ⁺ recombinant monomers, including those apparent gene conversion types, and containing only few molecules of this dimer plasmid.     

间充质干细胞在2019新型冠状病毒肺炎(COVID-19)中的治疗潜能、临床研究与应用前景*

当前因SARS-CoV-2感染而引起的2019新型冠状病毒肺炎(COVID-19)肆虐全球,严重危害人类健康。SARS-CoV-2感染性强,危重症患者死亡率高,尽管各种各样的治疗正在进行临床试验,但目前尚无有效的治疗方法。间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)在临床前试验中对多种疾病有良好的治疗效果,因而受到了广泛地关注。MSC可能利用分化潜能诱导分化成功能性肺样细胞、免疫调节与免疫细胞互作、抑制炎症来降低促炎细胞因子分泌、迁移和归巢靶向损伤肺部、抗病毒作用来减少肺上皮细胞中的病毒复制、产生细胞外囊泡来修复受损的组织,进而使COVID-19患者肺功能逐渐恢复正常,缓解并达到治疗COVID-19的目的。综合讨论了COVID-19的基本特征和当前主要治疗手段,同时总结了MSC在COVID-19中的临床研究和当前面临的挑战,探讨了MSC治疗COVID-19的应用前景,为MSC在COVID-19中的治疗提供了理论基础和现实依据。     

腹腔镜结肠癌根治术治疗老年局部进展期结肠癌的疗效和安全性及对患者免疫功能的影响

目的:比较分析腹腔镜和开腹结肠癌根治术治疗老年局部进展期结肠癌的临床疗效和安全性及对患者免疫功能的影响。方法:根据随机数字表法,将64例老年局部进展期结肠癌患者随机分为腹腔镜组和开腹组,每组各32例,分别接受腹腔镜、开腹结肠癌根治术治疗。比较两组手术相关指标、手术前后免疫功能变化、术后近远期并发症的发生情况及预后。结果:与开腹组比较,腹腔镜组患者手术时间明显延长,而术中出血量、胃肠功能恢复时间则明显缩短(P<0.05)。两组淋巴结清扫数比较差异无统计学意义(P>0.05)。术后3个月,腹腔镜组CD4+、CD4+/CD8+比值均明显高于开腹组(P<0.05),且与术前比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与开腹组比较,腹腔镜组患者术后切口感染的发生率明显降低(P<0.05),两组其他近期并发症如吻合口瘘、吻合口出血,远期并发症如黏连性肠梗阻、切口疝的发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。腹腔镜组与开腹组术后2年的局部复发率、1年和2年生存率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔镜手术和开腹手术治疗老年局部进展期结肠癌患者的临床疗效和预后相当,但腹腔镜手术对患者的免疫功能影响更小,且安全性更高。     

单切口腹腔镜在结直肠手术中的应用效果及对炎症因子与应激反应的影响

目的:探讨单切口腹腔镜在结直肠手术中的应用效果及对炎症因子与应激反应的影响。方法:选择2018年1月至2019年10月我院接诊的98例结直肠癌患者,通过随机数表法分为2组,每组49例。观察组使用单切口腹腔镜结直肠癌根治术,对照组使用传统腹腔镜结直肠癌根治术,常规5孔操作法。比较两组围术期相关情况、手术前后血清炎症因子水平的变化、手术后应激反应及并发症的发生情况。结果:两组淋巴结清扫个数、中转开腹例数、术后排气时间比较差异均无统计学意义(P0.05),观察组手术时间明显长于对照组,脐切口长度、住院时间、术中出血量均显著短于或低于对照组;两组术后1 d、3 d、5 d时高敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、皮质醇(Cor)水平均明显高于术前(P0.05);且观察组术后1d、3d、5d时hs-CRP、TNF-α、IL-6、NE、E、Cor较对照组显著降低(P0.05);两组吻合口瘘、吻合口狭窄、吻合口出血、小肠穿孔、肠梗阻、感染的总发生率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:和传统5孔操作法相比,单切口腹腔镜结直肠癌根治术治疗结直肠癌患者的手术时间更长,但术后炎症因子表达更低,应激反应更小,有利于患者术后恢复。     

不同纤维桩表面处理方式对牙根修复后抗折裂强度的影响

目的:探讨不同纤维桩表面处理方式对牙根修复后抗折裂强度的影响。方法:收集行正畸拔除的前磨牙120颗作为本研究样本,随机将120个纤维桩分为对照组、喷砂组和过氧化氢酸蚀组,每组40例。对照组纤维桩表明不给予任何处理,喷砂组给予氧化铝砂粒持续喷砂粗化处理,过氧化氢酸蚀组给予10%过氧化氢溶液处理,均包埋于纤维桩道预备好的离体牙内,采用相同树脂制备成核,行全冠修复与黏固,再模拟口腔内部环境给予样本牙冷热循环处理,经相同环境加载后,置于电子万能实验机获取样本牙抗折裂强度数据。对比三组离体牙样本体型数据、离体牙断裂方式、抗折裂强度,对三组进行为期24个月的定期随访,统计三组修复体断裂率,并采用Kaplan-Meier曲线和Log Rank法分析三组的生存状况。结果:三组的离体牙样本关于牙齿长度、牙根长度、颈部颊舌径及颈部近远中径对比差异无统计学意义(P0.05);喷砂组和过氧化氢酸蚀组的离体牙抗折裂强度显著强于对照组(P0.05);喷砂组和过氧化氢酸蚀组的牙齿折裂总发生率分别为20.00%和22.50%,均显著低于对照组的70.00%(P0.05)。但两组间比较差异无统计学意义(P0.05)。喷砂组、过氧化氢酸蚀组的生存状况显著优于对照组。结论:前磨牙修复过程中,对纤维桩表面进行喷砂或过氧化氢酸蚀处理均能提高牙根修复后抗折裂强度,改善修复体修复效果生存状况,且两种纤维桩表面处理方式对离体牙样本的断裂方式和抗折裂强度影响相当。     

腹腔镜辅助胃癌D2根治术联合胃背侧系膜近胃端完整系膜切除术对进展期胃癌患者肠黏膜屏障功能和腹腔微转移的影响

摘要 目的：探讨腹腔镜辅助胃癌D2根治术联合胃背侧系膜近胃端完整系膜切除术对进展期胃癌（AGC）患者肠黏膜屏障功能和腹腔微转移的影响。方法：选取2016年12月～2018年12月我院收治的105例AGC患者,按随机数字表法分为对照组（n=52）和实验组（n=53）,分别施行腹腔镜辅助胃癌D2根治术、腹腔镜辅助胃癌D2根治术联合胃背侧系膜近胃端完整系膜切除术。观察两组手术情况（淋巴结清扫数量、手术时间、术中出血量、近切缘距离）、胃肠功能恢复指标（肛门排气时间、经口进食时间、肠鸣音恢复时间）、并发症、住院时间及术前、术后1 d、3 d、7 d肠黏膜屏障功能[尿乳果糖/甘露醇（L/M）、血清二胺氧化酶（DAO）]、气腹后、关腹前腹腔微转移指标[多巴胺脱羧酶（DDC）、癌胚抗原（CEA）],并于术后12个月随访两组复发率。结果：实验组术中出血量少于对照组（P＜0.05）;两组经口进食时间、肛门排气时间、住院时间、肠鸣音恢复时间比较无差异（P＞0.05）;术前、术后1 d、3 d、7 d两组血清DAO水平、尿L/M比较无差异（P＞0.05）;关腹前实验组腹腔冲洗液DDC、CEA水平低于对照组（P＜0.05）;两组并发症总发生率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）;术后12个月随访,实验组和对照组各失访2例,实验组复发率3.92%（2/51）低于对照组20.00%（10/50）（P＜0.05）。结论：腹腔镜辅助胃癌D2根治术联合胃背侧系膜近胃端完整系膜切除术治疗AGC,能有效降低术中出血量,恢复胃肠功能,减少腹腔微转移及术后复发,且未增加肠黏膜屏障功能损伤,安全性高。     

经皮穴位电刺激联合全身麻醉对腹腔镜结直肠癌根治术患者炎性因子、T细胞亚群和认知功能的影响

摘要 目的：探讨经皮穴位电刺激（TEAS）联合全身麻醉对腹腔镜结直肠癌根治术患者炎性因子、T细胞亚群和认知功能的影响。方法：选取2018年6月~2019年9月期间我院收治的行腹腔镜结直肠癌根治术患者90例,根据随机数字表法分为对照组（n=45）和研究组（n=45）,对照组给予全身麻醉处理,研究组在对照组的基础上联合TEAS,比较两组患者炎性因子、T细胞亚群、认知功能及疼痛情况。结果：研究组术后1 d、术后5 d白介素-6（IL-6）、白介素-1（IL-1）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）低于对照组（P<0.05）。研究组术后1 d、术后5 d CD3⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD4⁺高于对照组,CD8+则低于对照组（P<0.05）。研究组术后1 d、术后3 d、术后5 d、术后7 d简易智力状态检查表（MMSE）评分高于对照组（P<0.05）。研究组术后6 h、术后12 h、术后24 h、术后48 h视觉模拟评分法（VAS）评分低于对照组（P<0.05）。两组术后5 d、术后7 d认知功能障碍（POCD）发生率比较差异无统计学意义（P>0.05）;研究组术后1 d、术后3dPOCD发生率低于对照组（P<0.05）。结论：TEAS联合全身麻醉治疗腹腔镜结直肠癌根治术患者,可降低炎性反应,减轻免疫抑制,同时还可降低对机体认知功能的损害。